Biolog铆a y Fisiolog铆a de la Reproducci贸n (BIOFREZ)

脕rea Estrat茅gica:
Introducci贸n:

El objetivo general del grupo es incrementar y mejorar la eficacia reproductiva en especies de animales dom茅sticos y silvestres, constituyendo su n煤cleo de investigaci贸n preferente la especie ovina.
El grupo est谩 constituido actualmente por 15 investigadores. Sus laboratorios est谩n en la Facultad de Veterinaria de la Universidad de Zaragoza, dentro de los Departamentos de Bioqu铆mica y Biolog铆a Molecular y Celular, y de Producci贸n Animal, estando integrado en el IUCA. Est谩 codirigido por los Dres. Jos茅 Alfonso Abecia Mart铆nez, Jos茅 脕lvaro Cebri谩n P茅rez, Fernando Forcada Miranda y Mar铆a Teresa Mui帽o Blanco. La labor del grupo se enmarca en investigaci贸n b谩sica y aplicada en las 谩reas de Biolog铆a Celular y Molecular y en Producci贸n Animal.
Los objetivos concretos del grupo Biolog铆a y Fisiolog铆a de la Reproducci贸n abarcan diferentes aspectos de Biolog铆a Celular y Molecular y Producci贸n Animal, relacionados con el manejo reproductivo que inciden directamente sobre la capacidad fecundante de las dosis seminales, sobre el desarrollo embrionario y la fertilidad, y por ello, en la eficacia y rendimiento de las explotaciones. Entre los objetivos principales destacan:

  • Preparaci贸n y selecci贸n de dosis seminales con alta capacidad fecundante.
  • Desarrollo de crioprotectores y sistemas de criopreservaci贸n.
  • Estudio y control de la capacitaci贸n y reacci贸n acros贸mica.
  • Mecanismos fisiol贸gicos implicados en la maduraci贸n esperm谩tica.
  • Preparaci贸n de dosis seminales 鈥渟exo-dirigidas鈥.
  • Desarrollo de la Fecundaci贸n 鈥渋n vitro鈥.
  • Efecto de la subnutrici贸n sobre los rendimientos reproductivos de la oveja.
  • Optimizaci贸n de tratamientos superovulatorios en programas de recuperaci贸n de razas en peligro de extinci贸n
  • Efecto de la subnutrici贸n sobre los rendimientos reproductivos de ovejas donadoras de embriones sometidas a tratamientos de superovulaci贸n, y de receptoras de embriones en programas MOET
  • Identificaci贸n electr贸nica animal

Nuestro grupo desarrolla simult谩neamente varios Proyectos de Investigaci贸n de 谩mbito nacional, auton贸mico e internacional, colaborando en el desarrollo de los planes Nacionales y Auton贸micos, dentro del 脕rea de Ganader铆a, en el apartado concreto de Mejora de las Tecnolog铆as de Producci贸n Animal, y a su vez, dentro del objetivo de Mejora de las Tecnolog铆as de Reproducci贸n de las especies ganaderas. Nuestros estudios est谩n centrados en aspectos b谩sicos, tecnol贸gicos y metodol贸gicos de la reproducci贸n ovina, que son potencialmente transferibles al sector. Para ello, se mantiene colaboraci贸n directa con el聽 CENSYRA de Movera y con las asociaciones de Arag贸n con mayor implantaci贸n en el sector, como son la Asociaci贸n de Ganaderos de Raza Rasa Aragonesa (ANGRA), y la Cooperativa UPRA-Pastores.

L铆neas de Investigaci贸n:
  1. Criopreservaci贸n de semen ovino y base molecular de los cambios de membrana asociados a la criopreservaci贸n.

    Desarrollo y puesta a punto de un m茅todo de congelaci贸n de esperma ovino analizando la congelabilidad de distintas subpoblaciones esperm谩ticas para la gesti贸n de bancos de germoplasma. Este m茅todo tendr谩 en cuenta aspectos de da帽o celular que no se reflejan en los par谩metros cl谩sicos de calidad seminal. Asimismo, se pretende la clonaci贸n de las prote铆nas de 14 y 20 kD del plasma seminal con capacidad protectora y reparadora del da帽o t茅rmico por fr铆o ejercido por la criopreservaci贸n. Por otra parte se trabaja en la selecci贸n y aislamiento de dosis seminales enriquecidas en caracter铆sticas espec铆ficas, particularmente en dosis enriquecidas en espermatozoides portadores del cromosoma Y o el X.

    El grupo est谩 desarrollando otros estudios moleculares conducentes al control de la maduraci贸n esperm谩tica y el proceso de apoptosis.

  2. Bases fisiol贸gicas de la mejora de la eficiencia reproductiva.

    Mejora de la eficiencia reproductiva en animales de renta utilizando como modelo el ganado ovino.

    Para ello, se estudian las posibilidades de conseguir una adecuada fertilidad y prolificidad en cada cubrici贸n o inseminaci贸n como consecuencia de una 贸ptima evaluaci贸n y control, tanto de la actividad sexual como del crecimiento y desarrollo folicular, determinando al final la tasa de ovulaci贸n.

    Se intenta optimizar la influencia sobre estos par谩metros de factores controlables a nivel de explotaci贸n, tanto ambientales (melatonina) como nutricionales y sociales.

    Asimismo, se analiza la influencia de dichos factores sobre los mecanismos que determinan la viabilidad embrionaria en la fase de vida libre del embri贸n, estudiando para ello tanto las concentraciones endometriales y oviductales de receptores de esteroides y oxitocina como niveles endometriales y plasm谩ticos de dichas hormonas, de prostaglandinas y de hormonas metab贸licas.

    Se analiza asimismo la producci贸n de interfer贸n tau por parte del embri贸n en los momentos previos a la implantaci贸n.

Experiencia:

El grupo viene obteniendo resultados interesantes desde el a帽o 1993, presentando un bagaje de aproximadamente 60 publicaciones SCI en los 煤ltimos 5 a帽os y la realizaci贸n de 8 Tesis Doctorales, se han desarrollado m谩s de 25 proyectos de investigaci贸n de 谩mbitos nacional e internacional. Se mantiene una colaboraci贸n activa con muchos otros grupos de investigadores de diferentes pa铆ses, hecho reflejado en la obtenci贸n y disfrute de proyectos comunes y en la presencia continuada en nuestro laboratorio de investigadores de distinta procedencia.
La experiencia del grupo est谩 centrada en dos macroenfoques b谩sicos, la biolog铆a del espermatozoide y la fisiolog铆a de la reproducci贸n. A su vez, estos quedan reflejados en los siguientes aspectos que constituyen y han constituido la base de los proyectos realizados por el grupo: la calidad esperm谩tica, el proceso de capacitaci贸n, la obtenci贸n y selecci贸n de dosis esperm谩ticas enriquecidas en caracter铆sticas espec铆ficas, los da帽os relacionados con la criopreservaci贸n, las condiciones en las que la melatonina mejora la tasa de ovulaci贸n y la prolificidad, el efecto de la subnutrici贸n sobre el desarrollo embrionario, el uso de la transferencia de embriones para la recuperaci贸n de poblaciones y la respuesta hormonal ligada a los procesos reproductivos.

Infraestructura:

RECURSOS LABORATORIALES (2009)

  • Unidad de Separaci贸n celular. Sistema de distribuci贸n en contracorriente con centrifugaci贸n
  • Unidad de Citometr铆a de Flujo
  • Unidad de Microscop铆a de Fluorescencia
  • Unidad de Fluorimetr铆a, Luminometr铆a y Absorbancia
  • Unidad de valoraci贸n densitom茅trica por UV e infrarrojos 鈥淥DYSSEY鈥
  • Laboratorio de Reproducci贸n para procesos de FIV, MIV
  • Unidad computarizada de espermatolog铆a
  • Unidad de sementales ovinos

METODOLOG脥A

  • M茅todos-Sistemas de valoraci贸n de la calidad seminal:
    • Motilidad Computarizada-CASA
    • Viabilidad celular-Fluorescencia
    • Nivel de Apoptosis: Inversi贸n de fosfatidilserina, actividad de caspasas, Fragmentaci贸n del DNA-TUNEL e Integridad mitocondrial
    • Grado de Capacitaci贸n-CTC
    • Respiraci贸n Esperm谩tica: Oximetr铆a
    • Uni贸n a zona pel煤cida (ZBA)
    • FIV
    • Actividad antioxidante: SOD, GPx, GRH, Catalasa, etc.
    • Sexaje de subpoblaciones esperm谩ticas
  • M茅todos-Sistemas de separaci贸n de subpoblaciones de espermatozoides:
    • Swim-up
    • Distribuci贸n en contracorriente con centrifugaci贸n
    • Centrifugaci贸n en gradiente: Lavado en Sacarosa, Lavado en Percoll.
    • Filtraci贸n.
  • M茅todos-Sistemas de an谩lisis de los componentes del plasma seminal
    • Cromatograf铆a en Gel filtraci贸n
    • Electroforesis
    • Fluorometr铆a
    • Valoraci贸n por densitometr铆a 鈥淥DISSEY鈥
    • Western-Blot
    • Equipo de electroforesis 1 y 2D
    • Purificaci贸n de prote铆nas
    • Electroeluci贸n, Di谩lisis.
  • M茅todos-Sistemas de estudio de la superficie esperm谩tica
    • Aislamiento de prote铆nas de membrana
    • Inmunocitoqu铆mica
    • Aislamiento de rafts
    • Obtenci贸n de anticuerpos policlonales
    • Disponibilidad de cit贸metro de flujo anal铆tico
  • M茅todos-Sistemas de congelaci贸n de espermatozoides
    • Ba帽o termost谩tico programable
    • Sistema computarizado de criopreservaci贸n
  • M茅todos-Sistemas de obtenci贸n-recogida de embriones
    • Inseminaci贸n Artificial intrauterina y exocervical en ovino
    • T茅cnicas de superovulaci贸n para producci贸n de embriones in vivo
    • Recuperaci贸n de embriones mediante laparotom铆a
    • Evaluaci贸n de la tasa de ovulaci贸n mediante laparoscopia y ecograf铆a transrectal
    • Conservaci贸n de embriones mediante vitrificaci贸n
    • Tecnolog铆a de transferencia embrionaria
  • M茅todos-Sistemas de Maduraci贸n y Fertilizaci贸n 鈥渋n vitro鈥
    • IVM, IVF y cultivo de embriones in vitro
    • Sexaje de embriones
Oferta tecnol贸gica:
  • Estudio de calidad seminal.
  • Espermiogramas.
  • Selecci贸n de sementales.
  • An谩lisis de hormonas (progesterona, testosterona, prostaglandinas, cortisol).
  • Asesor铆a a asociaciones de ganaderos sobre diversos aspectos de la reproducci贸n ovina: organizaci贸n del planning reproductivo de una explotaci贸n, inseminaci贸n artificial, uso de hormonas, manejo nutricional, etc.
  • Asesor铆a sobre las posibilidades de uso de la melatonina (sola o en combinaci贸n con otras hormonas) en la mejora de la reproducci贸n del ganado ovino.
  • Asesoria en sincronizaci贸n ovulatoria, obtenci贸n de embriones y transferencia embrionaria
Contacto:

Dr. Jos茅 A. Cebri谩n
Responsable del Grupo
pcebrian@unizar.es

Dpto. Bioqu铆mica y Biolog铆a Molecular y Celular

Facultad de Veterinaria